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Pronase inactivée comme la cause des résultats faussement positifs des tests sériques d’antigène cryptococcique

Quatre patients ayant eu un syndrome d’immunodéficience acquise et qui ont été évalués pour des céphalées dans la semaine ont présenté des résultats faussement positifs de tests d’antigène cryptococcique sérique. Cette série de résultats faussement positifs semble être due à l’inactivation du flacon de pronase dans le kit de test. , une cause qui n’a pas été rapportée précédemment

La méningite causée par Cryptococcus neoformans est une maladie opportuniste potentiellement fatale chez les patients atteints du sida . Un diagnostic précis et rapide est donc très important. Le test d’agglutination au latex largement utilisé pour l’antigène cryptococcique sérique est à la fois sensible et spécifique. des cas de résultats faussement positifs, notamment une infection par Trichosporon beigelii ou Capnocytophaga canimorsus , la présence d’une malignité ou de facteurs rhumatoïdes , et une contamination par de l’agar, de l’agarose ou du liquide de synérèse Pendant le pipetage en laboratoire Certains savons peuvent également causer des réactions faussement positives s’ils sont utilisés pour laver les lames à réutiliser Nous décrivons les patients qui ont eu des résultats faussement positifs d’un test d’agglutination au latex d’antigène cryptococcique sérique. probablement due à la présence de pronase inactivée dans le kit de test Tous les patients avaient le SIDA et avaient cherché des soins médicaux pour des Période de la semaine dans le tableau À l’examen, aucune fièvre, méningisme, altération de la conscience ou anomalie neurologique focale n’a été trouvée

Tableau View largeDownload slideRésultats des tests d’antigène cryptococcique des échantillons de sérum et de liquide céphalorachidien obtenus chez des patients atteints du SIDA qui ont été évalués pour des céphalées pendant une semaineTable View largeDownload slideRésultats de tests d’antigènes cryptococciques d’échantillons de sérum et de liquide céphalo-rachidien pendant une semaine Pour tester la méningite cryptococcique précoce en tant que cause de céphalée, des échantillons de sang ont été soumis pour un test d’antigène sérique cryptococcique effectué à l’aide d’un test d’agglutination au latex CALAS; Meridian Diagnostics Un résultat de test positif, qui a été trouvé pour tous les patients, a conduit chaque patient à subir une ponction lombaire et a également conduit à l’hospitalisation. Les échantillons du LCR étaient clairs et ne présentaient pas d’anomalies significatives chez tous les patients. Maladie pulmonaire cryptococcique Le traitement par l’amphotéricine B iv a été initié, mais il a été interrompu lorsque les résultats négatifs des tests d’antigène cryptococcique du LCR étaient disponibles. Les résultats des colorations bactériennes et fongiques et des cultures d’échantillons de LCR étaient également négatifs. Infection autre que l’infection par le VIH ou malignité Les facteurs rhumatoïdes n’ont pas été testés impétigo. Le suivi de ces patients, qui n’ont pas reçu de traitement antifongique prolongé, a eu lieu jusqu’à un an plus tard et n’a révélé aucune preuve de traitement antifongique par azole pour des patients atteints de cryptococcose. candidose muqueuseTesting de tous les patients a été fait avec l’utilisation du même ki Les tests ont été réalisés selon les instructions du fabricant. Les particules de latex de latex témoin enrobées d’immunoglobulines de lapin pour exclure une agglutination non spécifique ont montré des résultats négatifs pour tous les patients. Les tests ont été effectués par différents techniciens Ni le kit ni la solution de pronase a été utilisé après la date d’expiration La solution de pronase n’a pas semblé contaminée ou trouble, mais un échantillon de la solution n’a pas été cultivé pour les bactéries. Les tests d’antigène cryptococcique sérique ont été répétés avec un test de capture d’antigène EIA PREMIER EIA; Diagnostic du méridien Pour les patients -, le sérum initial a été utilisé, tandis qu’un sérum supplémentaire a été obtenu pour le patient. Les résultats de tous les tests répétés sur l ‘antigène cryptococcique étaient négatifs. En outre, nous avons soumis le test à Meridian Diagnostics. positif lorsque le test a été effectué avec l’utilisation de la même fiole de pronase que celle du test initial, mais négatif lorsque le test a été effectué avec un autre flacon de pronase obtenu à partir d’un kit portant le même numéro de lot. ces tests d’antigène cryptococcique sérique étaient faussement positifs sur la base de l’évolution clinique de la maladie chez les patients, les résultats négatifs du LCR et les résultats négatifs provoqués par la répétition des tests avec l’utilisation d’un système de test différent. le contrôle du latex était négatif chez tous les patients confirme la capacité limitée des contrôles internes à détecter les résultats des tests faussement positifs, comme le suggèrent De plus, les titres pour lesquels les titres d’antigène cryptococcique sérique ont été évalués ont des titres relativement faibles: Des titres faibles ont été rapportés comme étant caractéristiques des résultats faussement positifs Prétraitement des échantillons sériques avec la pronase, un protéolytique enzyme, réduit le nombre de résultats faussement positifs en éliminant les interférences non spécifiques avec les macroglobulines, comme les facteurs rhumatoïdes, ainsi que d’autres facteurs inconnus Contrairement à leur présence dans le sérum, les facteurs interférents sont pratiquement absents du CSF . Les spécimens ne nécessitent donc pas de traitement par pronase lorsque le test d’agglutination au latex de Meridian Diagnostics est utilisé. La différence entre les résultats du sérum et du LCR et le résultat négatif du test de sérum cryptococcique à l’aide d’une pronase le flacon obtenu à partir d’un kit différent suggère fortement que la pronase inactivée était la cause des résultats des tests faussement positifs Des mécanismes responsables pourraient inclure un stockage inadéquat ou la contamination du flacon de pronase A notre connaissance, un groupe temporel de résultats de tests d’antigènes cryptococciques faussement positifs n’a pas été rapporté précédemment. Sa présentation initiale suggérait une petite éclosion et une hospitalisation inutile de ces patients. il est donc recommandé d’interpréter avec prudence les résultats des tests d’antigène cryptococcique sérique, en particulier ceux pour les patients présentant un faible soupçon clinique de maladie cryptococcique et avec des titres faibles pour les résultats des tests sériques d’antigène cryptococcique